Effets du bloc ganglionnaire sympathique induit par l’éthanol sur la régénération nerveuse dans un modèle canin

Résumé

Source : Shionoya, Y., et al. Applications du bloc ganglionnaire sympathique cervical induit par l’éthanol pour favoriser la régénération du nerf alvéolaire inférieur canin à l’aide d’un nerf artificiel. J. Vis. Exp. (2018)

Cette vidéo présente un modèle canin de régénération du nerf alvéolaire inférieur (IAN) à l’aide d’un échafaudage biodégradable et d’un blocage sympathique induit par l’éthanol. La procédure consiste à accéder chirurgicalement au ganglion sympathique cervical et à injecter de l’éthanol pour induire une vasodilatation. L’augmentation du flux sanguin vers le site de la lésion, combinée à la régénération axonale guidée par les cellules de Schwann, favorise la régénération nerveuse.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Anesthésie et préparation de

1. la peau Anesthésier le chien avec un mélange de 5 mg/kg de chlorhydrate de kétamine et de 1 mg/kg de xylazine par injection intramusculaire.
2. Intuber avec un tube trachéal de 7,5 mm de diamètre et 25 cm de longueur.
3. Placez le chien dans la bonne position latérale. Maintenir l’anesthésie générale avec 3,2 % de sévoflurane avec de l’oxygène (1,0 L/min).
4. Utilisez un coussin chauffant pour maintenir la température corporelle à 37 °C.
5. Appliquez un gel ophtalmique sur la surface antérieure des yeux pour éviter l’abrasion de la cornée.
6. Rasez soigneusement le champ opératoire (côté gauche de la poitrine) à l’aide d’une tondeuse chirurgicale. Vaporisez une quantité substantielle de solution alcoolisée sur le site opératoire. Attendez au moins 15 secondes. Répétez l’application 3 fois.
7. Enregistrez la fréquence cardiaque et la saturation en oxygène pendant l’opération.

2. Reconstruction du nerf alvéolaire inférieur à l’aide d’un tube de collagène à l’acide polyglycolique (PGA-C) : développement du modèle de reconstruction uniquement

1. Injectez 3 ml de lidocaïne à 1 % à l’aide d’une aiguille de 27 G dans la gencive mandibulaire gauche comme anesthésique et analgésique local.
2. Effectuez une incision transversale de 5 cm avec une lame de scalpel numéro 15 dans la gencive mandibulaire gauche pour exposer la mandibule de l’animal.
3. Utilisez des vibrations ultrasoniques piézoélectriques pour broyer la face proximale de la mandibule en un rectangle de 3 cm × 8 mm à travers le foramen mentonnier postérieur.
   REMARQUE : La fréquence de vibration était de 28 à 32 kHz.
4. Retirer la partie frontale de la plaque osseuse mandibulaire (dimensions, 3 cm × 8 mm) pour exposer le IAN gauche (Figure 1A).
   REMARQUE : Le site de reconstruction correspond à l’apex racinaire de la première molaire
5. Transecter le IAN à l’aide d’un scalpel pour prélever un segment de 10 mm.
6. Insérez les moignons proximal et distal du nerf sectionné dans le tube nerveux à une profondeur de 2 mm.
7. Utilisation 8-0 des sutures en nylon et un microscope chirurgical à un grossissement de 8X pour suturer le tube jusqu’aux extrémités nerveuses proximale et distale (figure 1B).
8. Remettez la plaque osseuse à son emplacement d’origine dans la mandibule.
9. Fermez la plaie avec des sutures en nylon 4-0.
10. Un jour après la chirurgie, confirmez que la plaque osseuse mandibulaire est dans sa bonne position.
    1. 4.10.1 Effectuer une imagerie par tomodensitométrie (TDM) de l’os facial sous anesthésie. Réglez les paramètres TC comme suit : 120 kVp, 200 mAs, 0,5 mm/s, épaisseur de coupe de 0,5 mm.
       1. Administrer l’anesthésie en utilisant un mélange de 5 mg/kg de chlorhydrate de kétamine et de 1 mg/kg de xylazine (Figure 2).
11. Administrez de l’ampicilline (100 mg/jour) comme antibiotique et de l’acétaminophène (100 mg/jour) comme analgésique pendant une semaine après la chirurgie.

3. Bloc ganglionnaire sympathique cervical induit par l’éthanol (CSGB) : Développement du modèle de reconstruction + CSGB

1. Effectuez la reconstruction IAN comme décrit dans la section 2 et prévoyez une semaine pour la récupération.
2. Anesthésier l’animal avec 1,5 % de sévoflurane dans l’oxygène (4 L/min) et l’air (6 L/min). Rasez et nettoyez le champ opératoire prévu, comme décrit dans la section 3.
3. Marquez la ligne d’incision à l’aide d’un marqueur cutané chirurgical en traçant une ligne sur le côté gauche de la poitrine (Figure 3, la ligne d’incision mesure 20 cm de longueur).
4. Injecter 5 ml de lidocaïne à 1 % à l’aide d’une aiguille de 21 g dans la région gauche du thorax comme anesthésique et analgésique local.
5. Incisez la peau du côté gauche de la poitrine avec une lame de scalpel numéro 10.
6. Incisez la couche de graisse avec un scalpel électrique pour exposer le fascia musculaire.
7. Exposez le muscle dentelé ventral et le muscle scalène.
8. Soulevez le muscle dentelé ventral et le muscle scalène de la ventrale à la dorsale pour exposer les deuxième et troisième côtes (Figure 4).
9. Effectuez une thoracotomie latérale gauche au niveau des deuxième et troisième espaces intercostaux pour exposer le ganglion sympathique cervical gauche (Figure 5).
10. Injecter 0,2 mL d’éthanol à 99,5 % dans le ganglion sympathique cervical à l’aide d’une aiguille de 30 G sous visualisation directe (figure 6).
11. Fermez l’espace intercostal avec des points de suture résorbables 1-0 interrompus.
12. Fermez la peau avec des points de nylon 3-0 interrompus.
13. Administrez de l’ampicilline (100 mg/jour) comme antibiotique et de l’acétaminophène (100 mg/jour) comme analgésique pendant une semaine après la chirurgie.
14. 1 semaine après le CSGB, mesurer la température de la peau du visage par thermographie infrarouge pour confirmer le CSGB.

Résultats

Figure 1 : Nerf alvéolaire inférieur gauche (IAN) avant et après la reconstruction. A) Image de pré-reconstruction du IAN gauche après avoir été exposé par le ablation de l’os. B) Image post-reconstru...

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Tondeuses chirurgicales	Roboz Surgical Instrument Company	RC-5903
Scalpel jetable (No.15)	Kai medical	219ABBZX00073000
VarioSurg3	Nakanishi	VS3-LED-HPSC, E1133	Chirurgie piézoélectrique pour le traitement osseux
4-0 sutures en nylon Ethicon		8881H
8-0 sutures en nylon	Ethicon	2775G
Isepamicin sulfate	Nichi-Iko	620005641
Scalpel jetable (n°10)	Kai medical	219ABBZX00073000
Aiguille de calibre 30	Nipro	1134
1-0 points résorbables	Ethicon	J347H
3-0 Points de nylon	Ethicon	8872H
Neo Thermo	NEC Avio	TVS-700	Thermographie infrarouge